检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立

摘要：

以大肠杆菌系统表达的H9亚型禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)为抗原包被ELISA板,通过反应条件的筛选,建立检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA(NP-ELISA)方法.结果表明,抗原最佳包被质量浓度为7.56 μg/ml,血清最适稀释度为1:160,作用时间为60 min;辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鸡IgG最适稀释度为1:5 000,血清和酶标抗体最适作用时间为60 min.特异性试验结果表明,NP抗原可与H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体发生反应,经NP-ELISA检测为阳性的H9亚型AI血清样品能够被H9亚型AIV阻断,而NP抗原与新城疫等4种疫病阳性血清不发生反应.对223份待检鸡血清进行检测,NP-ELISA阳性检出率为96.86%(216/223),而血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验结果分别为93.72%(209/223)和81.61%(182/223),表明NP-ELISA是检测禽流感型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术.

关键词：禽流感病毒、重组核蛋白、NP-ELISA、抗体检测

所属期刊栏目：26

分类号：S858.353(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十一五"科技支撑计划专项2006BAD06A08

在线出版日期：2010-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：359-363