高原牦牛SRY基因的克隆与原核表达

摘要：

为从分子水平了解牦牛的性别形成机制,对高原牦牛SRY(Sex-determining region on the Y chromosome,SRY)基因的编码区进行了克隆表达.以雄性高原牦牛血液为材料,从基因组DNA中扩增SRY基因编码区(单外显子)序列,将其克隆至pGEM-T easy载体并测序;将牦牛SRY基因编码区连接至pET-28a(+)载体,构建表达载体pET-28a/SRY;把表达载体pET-28a/SRY转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中,在合适的条件下诱导表达;对表达产物进行Western-blot检测.结果表明:牦牛SRY基因(GenBank: EU547257)编码区长687 bp,编码229个氨基酸;成功构建了表达载体pET-28a/SRY,并且SRY蛋白得到了大量表达;Western-blot进一步验证了其表达成功.

关键词：牦牛、SRY基因、克隆、表达

所属期刊栏目：26

分类号：S823.8~+5(家畜)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目BRF070105

在线出版日期：2010-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：107-112