洋葱(Allium cepa L.)RAPD-PCR反应体系及扩增程序的优化

摘要：

为建立多态性高、稳定性好的洋葱RAPD-PCR反应体系,采用正交设计,研究了Taq酶、Mg2+、引物和dNTP 4种RAPD-PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,在此基础上对模板DNA用量、扩增程序中退火温度和反应循环次数进行了筛选.试验结果表明,洋葱20 μl RAPD-PCR优化反应体系为1×Buffer、2.0 mmol/L Mg2+、1.0 U Taq DNA聚合酶、200 μmol/L dNTP、0.6 μmol/L引物、2%甘油和15 ng DNA模板;PCR扩增程序为94℃预变性4 min;94℃变性30 s,35℃退火40 s,72℃延长1.5 min,45个循环;72℃保温延伸7 min.

关键词：洋葱、RAPD-PCR反应体系、扩增程序、正交设计

所属期刊栏目：22

分类号：S6(园艺)

资助基金：江苏省连云港市科技局资助项目NY0403

在线出版日期：2007-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：434-438