干酪乳杆菌蛋白酶纯化与动力学性质

摘要：

干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)6033经增菌培养、超声波破碎、冷冻离心后获得粗酶液.粗酶液经硫酸铵分级沉淀后,分别进行阴离子交换层析、疏水层析、分子筛层析,最终获得1种纯蛋白酶.该酶分子量为61.2 kD,可被苯甲基磺酰氟(PMSF)和乙二胺四乙酸(EDTA)强烈抑制,Co2+和Ca2+能增强该酶活力,Fe3+、Zn2+和Cu2+对其活性则有抑制作用.该酶在37 ℃时,最大酶活力出现在pH值7.0附近,pH 4.0时相对酶活力下降到39.0%,而pH 9.0时相对酶活力仅维持在8.0%左右.pH 7.0时该酶的最适温度为37℃左右,20℃时相对酶活力下降到54.0%,而60 ℃时相对酶活力仅为34.0%.以酪蛋白作为底物时测得该酶Km值为1.5 mg/ml、Vmax为32.0.

关键词：干酪乳杆菌、蛋白酶、纯化、动力学性质

所属期刊栏目：20

分类号：Q556+.9(酶)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA248031

在线出版日期：2004-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：100-105