呋喃唑酮代谢物人工抗原的制备与鉴定

摘要：

制备了呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑烷酮(AOZ)的人工抗原,再采用重氮法将AOZ衍生物2-NP-AOZ与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫原2-NP-AOZ-BSA和包被原2-NP-AOZ-OVA,通过SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS分析其偶联效果.以2-NP-AOZ-BSA皮下注射免疫SPF级BALB/c小鼠,分别于3次免疫和5次免疫后制备血清,以间接ELISA检测血清中2-NP-AOZ抗体效价,间接竞争ELISA检测血清敏感性,鉴定其免疫原性.发现2-NP-AOZ分别与BSA和OVA偶联成功,获得免疫原2-NP-AOZ-BSA和包被原2-NP-AOZ-OVA;MALDI-TOF-MS分析测得偶联率分别为7.1:1、3.8:1;BCA试剂盒检测2-NP-AOZ-BSA、2-NP-AOZ-OVA的浓度分别为4.9、5.2 mg/mL.间接ELISA检测3次免疫后小鼠血清抗体效价均达1:16000及以上,5次免疫后血清抗体效价均达1:32000及以上;半数抑制浓度(IC50)为34.43 ng/mL,人工抗原2-NP-AOZ-BSA免疫原性优良.本研究成功合成了AOZ完全抗原,为AOZ单克隆抗体制备及快速检测方法的建立奠定了基础.

关键词：呋喃唑酮代谢物(AOZ)、偶联、人工抗原、ELISA

所属期刊栏目：50

分类号：S852.4+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省高等学校自然科学研究面上项目;江苏省泰州市科技支撑计划社会发展项目;江苏农牧科技职业学院校级科研项目;江苏省大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2022-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：192-197