10.15889/j.issn.1002-1302.2020.14.010
大豆GmGolS基因的原核表达及抗旱性分析
肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,简称GolS)是棉子糖系列寡糖(raffinose family oligosaccharides,简称RFOs)生物合成途径中的关键酶,在植物应对非生物胁迫的过程中发挥着重要作用.通过逆转录(RT)-PCR从大豆叶片cDNA中扩增得到编码肌醇半乳糖苷合成酶的基因GmGolS,再将GmGolS基因构建到原核表达载体pET28上,然后将载体导人大肠杆菌Rosetta(DE3)中,对其进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalacto pyranoside,简称IPTG)诱导.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)结果表明,在诱导时间为3h、IPTG浓度为0.1 mmol/L的条件下,可以获得大量重组蛋白,分子量约为40 ku.对表达GmGolS蛋白的大肠杆菌进行抗旱性分析的结果显示,GmGolS基因在大肠杆菌中的过表达降低了重组菌的生活力,使其对干旱胁迫更加敏感.
大豆、肌醇半乳糖苷合成酶、原核表达、抗旱性
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S565.101(经济作物)
黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划;黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目植物性食品加工技术特色学科专项;黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目
2020-10-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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