10.15889/j.issn.1002-1302.2020.10.013
凤丹牡丹二氢黄酮醇-4-还原酶基因克隆及表达特性分析
以凤丹种皮为材料,克隆花青素生物合成中的关键基因DFR,并进行功能验证.结果表明,凤丹DFR基因含有长度为1092 bp的开放阅读框(ORF),共编码364个氨基酸.其中,凤丹DFR蛋白的相对分子量为40796.17 u,理论等电点(PI)为5.76.实时荧光定量分析凤丹牡丹种子4个发育阶段的PoDFR基因表达水平,结果表明,在凤丹种子发育过程中,PoDFR基因的表达水平先增加后减少,在S2时期达到最高.构建PoDFR基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达以获得PoDFR的原核表达蛋白.体外酶促反应和高效液相色谱法表明,PoDFR蛋白可以催化二氢槲皮素合成无色花青素,通过与PoANS蛋白结合合成花青素,证明PoDFR基因具有相应的功能活性.
凤丹牡丹、DFR基因、二氢槲皮素、花青素、表达特性、功能
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S685.110.1(观赏园艺(花卉和观赏树木))
公益性行业林业科研重大专项;国家自然科学基金
2020-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
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