苏云金芽孢杆菌cry1Da5基因的克隆与表达

摘要：

采用5对引物组合经2轮PCR扩增对苏云金芽孢杆菌QL75-2菌株中的cry基因进行鉴定,克隆得到1个cry1Da型基因片段.通过设计全长引物扩增得到该cry基因的全长序列,转入原核表达载体pET-28a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,最后对表达蛋白进行生物活性分析.序列分析结果表明,该cry1Da基因全长3495 bp,推测其编码1164个氨基酸,组成分子量约132.01 ku的蛋白质.该预测蛋白质与已知的Cry1Da3蛋白质具有最高的序列同源性(99.7％),该基因被国际杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cry1Da5.生物活性分析结果表明,Cry1Da5蛋白质对鳞翅目的甜菜夜蛾幼虫具有较强的杀虫活性,其LC50为21.47μg/mL,而对鳞翅目的棉铃虫幼虫无杀虫活性.因此,cry1 Da5基因可作为一个新的cry基因资源在甜菜夜蛾的生物防治中应用.

关键词：苏云金芽孢杆菌、简并引物、cry1Da5基因、棉铃虫、甜菜夜蛾、杀虫活性

所属期刊栏目：48

分类号：S182(农业生物学)

资助基金：渭南市科技计划;渭南职业技术学院校级重点课题

在线出版日期：2020-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：118-122