10.15889/j.issn.1002-1302.2018.07.009
乙醛脱氢酶基因表达载体的构建及表达条件筛选
通过PCR扩增得到酿酒酵母乙醛脱氢酶基因ALDH长约1.6 kb的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并将该序列与pET30a(+)载体相连,得到pET30a-ALDH重组质粒,使其在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达;对含有pET30a-ALDH重组质粒的工程菌进行表达条件分析,发现当异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)浓度为1.0 mmol/L、诱导温度为28℃、诱导表达时间为6h时,ALDH酶相对活性达到最高,为30.2 U/mL.
酿酒酵母、pET30a-ALDH、诱导表达、表达条件、ALD
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Q786(基因工程(遗传工程))
江苏省产学研联合创新资金-前瞻性联合研究BY2014031;江苏省重点研发计划BE2016316;江苏省徐州市科技计划KC14SM094、XF13C027;徐州工程学院重点培育课题XKY2015104
2018-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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