一种新的镰刀菌 Q7－31木聚糖酶 Xyn9的分离纯化鉴定及酶学特性

摘要：

为对植物病原菌镰刀菌（ Fusarium sp．） Q7－31所产木聚糖酶进行鉴定及酶学特性分析，在发酵产酶培养基上对Q7－31进行发酵培养，获得能够高效降解植物细胞壁的粗酶液。然后，采用Sephacry S－100凝胶柱层析和DEAE弱阴离子交换柱层析对粗酶液进行分离纯化后得到木聚糖酶Xyn9，并对其开展蛋白质组学研究和酶学特性分析。结果表明：粗酶液中木聚糖酶比活为16．58 U／mg，纤维素酶比活为0．428 U／mg，细胞壁降解酶比活为0．0198 U／mg，蛋白含量为2．17 mg／mL。 Xyn9的蛋白质组学研究结果显示，其分子量为21 ku、等电点为6．86，接近GH10家族。纯化后Xyn9的酶学特性表明，最适反应温度为47℃，最适pH值为5．6，该酶在33℃以下和在pH值5～6的范围内较稳定；金属离子K＋对该酶有激活作用，Na＋、Ca2＋、Mg2＋、Zn2＋抑制该酶活性，Cu2＋、Hg＋使该酶完全失活。综合Xyn9的分子量、蛋白质组学结果以及酶学特性，最终将其鉴定为一种新的介于GH10家族与GH11家族之间的内切木聚糖酶。

关键词：镰刀菌、木聚糖酶、分离纯化、串联质谱鉴定、酶学特性

分类号：Q55;Q814.1(酶)

资助基金：国家自然科学基金编号31260021；青海省科技项目编号2014－Z －903；青海省科技厅重点基础研究编号2011－Z－14；国家重点实验室培育基地青海省高原作物种质资源创新与利用重点实验室开放课题编号2011－05；青海大学高层次人才项目编号2012－QGC－4。

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：42-45