水稻种子酵母双杂交体系的构建及种子特异表达蛋白 ONAC023互作蛋白的鉴定

摘要：

酵母双杂交是常用的蛋白-蛋白检测技术。以水稻受精5d的幼嫩种子为材料，构建了适用于水稻种子发育相关蛋白的互作蛋白酵母双杂交筛选平台，cDNA文库容量达到1．1×106，平均插入大小约为750 bp，开发了改良的酵母菌落PCR方法，用于文库插入片段的扩增，大大提高了筛选效率。 NAC是植物特有的一类转录因子，在植物发育、抗逆等多个方面发挥着重要功能。 RT-PCR结果显示，NAC家族成员ONAC023在种子中特异表达，可能调控种子早期发育。以ONAC023为诱饵，成功地筛选到21个互作蛋白候选基因，其中包含1个DNA linding protein ，推测其可能是ONAC023蛋白复合物的成员。

关键词：水稻、酵母双杂交、种子发育、NAC

分类号：S511.035.1(禾谷类作物)

资助基金：国家科技支撑计划编号2012BAD19B03；国家转基因生物新品种培育专项编号2011ZX08010-005；中国农业科学院科技创新工程。

在线出版日期：2014-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：16-19,20