微小RNA-1291对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制研究
目的 探讨微小RNA-1291(miR-1291)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制.方法 通过公共数据库分析miR-1291在胃癌组织、正常胃组织中的表达.培养人胃癌细胞SGC-7901、人胃黏膜上皮细胞GES-1,比较miR-1291表达水平.将 miR-1291 mimic、miR-NC、miR-1291 inhibitor、miR inhibitor 质粒分别转染至 SGC-7901 细胞,设为 miR-1291 组、miR-NC组、miR-1291 inhibitor 组、miR inhibitor 组.将 BMP 激活素膜结合抑制因子(BAMBI)mimic 质粒、Vector 质粒、sh-BAMBI 质粒、sh-NC质粒分别转染至SGC-7901细胞中,设为BAMBI组、Vector组、sh-BAMBI组、sh-NC组.采用CCK-8法检测细胞增殖能力,采用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1291和BAMBI mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测BAMBI、转化生长因子-β(TGF-β)、SMAD同源物4(SMAD4)蛋白水平,通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-1291和BAMBI的靶向关系.结果 胃癌组织miR-1291表达水平为(0.85±0.11),低于正常胃组织的(2.02±0.23),差异有统计学意义(t=18.33,P<0.01).SGC-7901细胞miR-1291表达水平低于GES-1细胞,BAMBI蛋白、BAMBI mRNA表达水平高于GES-1细胞,差异有统计学意义(P<0.01).miR-1291组细胞72 h时光密度(OD)值、侵袭细胞数、迁移细胞数低于或少于miR-NC组,miR-1291 inhibitor组细胞72 h时OD值、侵袭细胞数、迁移细胞数高于或多于miR inhibitor组,差异有统计学意义(P<0.01).BAMBI组细胞72 h时OD值、侵袭细胞数、迁移细胞数高于或多于Vector组,sh-BAMBI组细胞72 h时OD值、侵袭细胞数、迁移细胞数低于或少于sh-NC组,差异有统计学意义(P<0.01).miR-1291组细胞BAMBI蛋白、BAMBImRNA表达水平低于miR-NC组,miR-1291 inhibitor组细胞BAMBI蛋白、BAMBI mRNA表达水平高于miR inhibitor组,差异有统计学意义(P<0.01).双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-1291与BAMBI存在靶向关系.BAMBI组TGF-β、SMAD4蛋白水平低于Vector组,sh-BAMBI组TGF-β、SMAD4蛋白水平高于sh-NC组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 miR-1291可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与负性调控BAMBI表达进而抑制TGF-β通路有关.
胃癌、微小RNA-1291、BMP激活素膜结合抑制因子、转化生长因子-β、SMAD同源物4
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R735.2;R73-3(肿瘤学)
2023-06-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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39-45,52