卵巢癌中环状RNA-101748高表达的病理意义及对增殖的影响

摘要：

目的 探讨浆液性卵巢癌(SOC)中环状RNA-101748(circ-101748)表达的病理意义及其通过调控微小RNA(miR)-340表达对卵巢癌细胞增殖的影响.方法 收集SOC病例69例.采用RNA原位分子杂交技术(RISH)检测circ-101748在浆液性卵巢癌中的阳性表达情况,统计分析circ-101748阳性表达与SOC病理特征的关系;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)增殖活性实验检测circ-101748对卵巢癌细胞增殖的影响;基于生物信息学预测circ-101748的下游miRNA及其下游靶蛋白;通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和双荧光素酶报告实验验证circ-101748对miR-340的调控及miR-340对Ki-67的调控作用;通过回复实验证实circ-101748/miR-340信号轴对Ki-67的调控及对卵巢癌细胞增殖的影响.结果 RISH结果显示,circ-101748阳性染色为棕黄色,定位于胞质和胞核;circ-101748阳性例数占比为73.91％(51/69),高于癌旁正常组织的11.59％(8/69),差异有统计学意义(P＜0.05).在SOC中,circ-101748的阳性表达与肿瘤直径(x2=9.763,P＜0.05)、肿瘤分期(x2=9.656,P＜0.05)密切相关,但与年龄、病理级别、淋巴结转移无关联(P＞0.05).MTT实验表明,过表达circ-101748后卵巢癌细胞的增殖活性显著升高,而降低circ-101748表达后卵巢癌细胞的增殖活性显著降低(P＜0.05).通过circBANK预测miR-340是circ-101748的靶基因;qRT-PCR结果表明,在卵巢癌细胞中过表达circ-101748后,miR-340表达水平显著下降(P＜0.05),降低circ-101748表达后,miR-340表达水平显著升高(P＜0.05).双荧光素酶报告实验证实,circ-101748能与miR-340特异性结合,并可负性调控miR-340的表达.通过TargetScan和miRbase预测增殖蛋白Ki-67是miR-340的下游靶基因,进一步双荧光素酶报告实验验证表明,野生型Ki-67 3'非翻译区(3'UTR)可降低miR-340的荧光素酶活性,提示miR-340通过Ki-67 3'UTR抑制Ki-67蛋白的表达.回复实验结果表明,过表达miR-340可以消除circ-101748对卵巢癌细胞增殖蛋白Ki-67的促进表达作用,而过表达circ-101748或降低miR-340的表达可进一步激发卵巢癌细胞增殖蛋白Ki-67的表达;circ-101748能直接抑制miR-340的表达,而miR-340能直接抑制Ki-67的表达,circ-101748/miR-340/Ki-67信号通路在卵巢癌生长和增殖中起到显著促进作用.结论 在卵巢癌中circ-101748为致癌基因,可通过调控miR-340/Ki-67信号轴促进卵巢癌细胞增殖和生长.

关键词：卵巢癌、circ-101748、miR-340、增殖、病理意义、Ki-67蛋白

所属期刊栏目：27

分类号：R365;R711.75(病理学)

资助基金：江苏省妇幼健康科研项目;江苏省扬州市市级计划

在线出版日期：2023-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：23-29