lncRNA CYTOR/miR-193b-3p/HMGB1 轴调控T细胞急性淋巴细胞白血病细胞MOLT-4增殖与凋亡的作用研究

摘要：

目的 探讨lncRNA CYTOR对T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞增殖和凋亡的影响及可能机制.方法 体外培养人正常骨髓基质细胞系HS-5和T-ALL细胞系(CCRF-CEM、MOLT-4、CEM-C1),采用逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞中lncRNA CYTOR、miR-193b-3p和HMGBlmRNA表达;采用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞中HMGB1 蛋白表达.分别转染 si-CYTOR、miR-193b-3p mimics、si-HMGB1 及共转染 si-CYTOR 与 anti-miR-193b-3p 至 MOLT-4 细胞,以CCK-8法检测细胞增殖,以流式细胞术检测细胞凋亡,以Western blot法检测细胞Bax和Bcl-2、cleaved-caspase3蛋白表达.通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA CYTOR与miR-193b-3p、miR-193b-3p与HMGB1的调控关系.结果 与HS-5细胞比较,T-ALL 细胞系(CCRF-CEM、MOLT-4、CEM-C1)中 lncRNA CYTOR、HMGB1 mRNA 及其蛋白表达均升高,miR-193b-3p表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).下调lncRNA CYTOR、上调miR-193b-3p或下调HMGB1后,MOLT-4细胞增殖受到抑制,Bcl-2蛋白表达降低,凋亡率和细胞中Bax、cleaved-caspase3蛋白表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05).lncRNA CYTOR竞争性吸附miR-193b-3p,HMGB1是miR-193b-3p的靶基因.上调HMGB1表达可逆转lncRNA CYTOR对T-ALL细胞MOLT-4增殖和凋亡的作用.敲低miR-193b-3p可逆转lncRNA CYTOR对MOLT-4细胞增殖和凋亡的作用.结论 lncRNA CYTOR在T-ALL细胞系中表达上调,其可能通过竞争性吸附miR-193b-3p进而上调HMGB1的表达来促进T-ALL细胞增殖,并阻碍细胞凋亡,其有可能成为T-ALL治疗的分子靶点.

关键词：T细胞急性淋巴细胞白血病、lncRNA CYTOR、miR-193b-3p、HMGB1、细胞增殖、凋亡

所属期刊栏目：26

分类号：R733.7;R446(肿瘤学)

资助基金：山东省济宁市重点研发计划项目2021YXNS014

在线出版日期：2023-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：90-97,102