电穿孔法基因转染K562细胞条件的优化

摘要：

目的 以绿色荧光蛋白(GFP)为观察指标优化K562细胞的电穿孔基因转染条件.方法 通过改变悬液体积、温度及缓冲液、质粒浓度等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒DNA转入K562细胞,通过流式细胞仪和荧光显微镜观察转染效率.结果 ①在电压250 V、电容950ìF的条件下,K 562细胞得到58.6%的最大转染率.②应用0.4 mL细胞悬液体积,当质粒浓度≥20ìg/mL时可得到较高的转染效率.③温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大.结论 电穿孔是一种高效的基因转染法,通过优化条件,可提高转染率.

关键词：电穿孔、K562细胞、转染、优化

所属期刊栏目：12

分类号：R55(血液及淋巴系疾病)

资助基金：湖南省自然科学基金2006-2007资助项目05-JJ 30164

在线出版日期：2009-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：43-45,49