自噬对粒细胞样髓源性抑制细胞生存与功能的影响

摘要：

目的:初步探索自噬对Lewis肺癌移植瘤小鼠脾脏中粒细胞样髓源性抑制细胞(granulocytic myeloid de-rived suppressor cells,G-MDSCs)体外存活能力与抑制性功能分子的影响.方法:Lewis肺癌细胞系体外培养后,构建小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤模型,通过免疫磁珠分选方法获得脾脏G-MDSCs,与荧光抗体(Ly-6C-FITC/Ly-6G-PE/CD11 b-PE/CY5)孵育后,流式细胞术检测G-MDSCs细胞纯度;瑞吉染色后观察其形态特征;采用雷帕霉素和氯喹处理后,通过蛋白质印迹法和流式细胞术检测自噬标志性分子微管相关蛋白1-轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3-Ⅱ)蛋白的表达水平.培养体系中加入雷帕霉素和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methy-ladenine,3-MA),7-AAD染色检测自噬对G-MDSCs生存的影响;提取细胞总蛋白后检测胞内精氨酸酶的水平.结果:通过磁珠分选的方法可从小鼠脾脏中获得纯度较高的G-MDSCs,其细胞核呈环状或分叶状.雷帕霉素处理G-MDSCs后LC3-Ⅱ表达水平上调,3-MA抑制自噬作用后,G-MDSCs存活率降低,精氨酸酶活性下降.结论:自噬能够促进G-MDSCs体外存活并上调抑制性效应分子精氨酸酶的表达,提示自噬是调控G-MDSCs生物学功能的重要因素.

关键词：粒细胞样髓源性抑制细胞、自噬、Lewis肺癌细胞、3-甲基腺嘌呤、精氨酸酶、免疫疗法

所属期刊栏目：30

分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：江苏省卫生健康委科研项目;江苏省医学重点人才项目

在线出版日期：2020-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：466-470,485