阴道毛滴虫巨噬细胞迁移抑制因子的原核表达 及多克隆抗体制备

摘要：

目的:原核表达阴道毛滴虫巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor of Trichomonas vaginalis,TvMIF)并制备多克隆抗体.方法:采用PCR技术扩增TvMIF基因,并克隆至pTG19-T载体,酶切及测序鉴定后,再定向插入pET-30a(+)载体.将重组载体转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导蛋白表达.采用镍柱亲和层析法纯化TvMIF蛋白,并免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,蛋白质印迹法检测多克隆抗体.结果:从阴道毛滴虫cDNA中扩增出TvMIF基因片段,测序结果与基因库收录序列一致.成功构建pET-30a-TvMIF重组质粒,重组TvMIF蛋白约为15.5 kDa,以可溶性蛋白形式存在.获得TvMIF重组蛋白的多克隆抗体,蛋白印迹法检出TvMIF的特异性条带.结论:成功获得阴道毛滴虫MIF蛋白并制备了多克隆抗体,可用于后续研究阴道毛滴虫致病机制.

关键词：阴道毛滴虫、巨噬细胞迁移抑制因子、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：29

分类号：R382.21(医学寄生虫学)

资助基金：科技部基础平台资助项目平台-TDRC-22;国家公益性卫生行业科研专项201502021;卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室开放课题WSBKTKT201601

在线出版日期：2019-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：17-20