负载富血小板纤维蛋白的新型水凝胶对BMSCs体外成软骨分化的影响

摘要：

目的:探究负载富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)的新型水凝胶对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)体外成软骨分化的影响.方法:配制体积比为6:1:1的2%壳聚糖/56%β-甘油磷酸钠/0.1%京尼平混合液,置于37℃恒温水浴箱后观察其成胶时间;通过一次离心法(1200 r/min,12 min)制备PRF,将PRF冻干研磨成粉后加入上述混合液,置于37℃制备负载PRF的新型水凝胶.接种BMSCs于水凝胶表面,培养1、3、7 d后通过二乙酸荧光素(fluoresceindiacetate,FDA)荧光染色观察其增殖情况;再将细胞接种于24孔板,分为负载PRF的新型水凝胶组(PRF组)、壳聚糖水凝胶组(壳聚糖组)以及单纯诱导组,分别添加适量材料后进行成软骨诱导,第2周结束时每组取12孔分别进行HE染色、番红O-固绿染色、阿利新蓝染色、兔Ⅱ型胶原免疫组化染色观察软骨分化情况;其余细胞诱导至第4周结束,阿利新蓝比色法和ELISA法检测每周收集上清液中糖胺聚糖及Ⅱ型胶原含量.结果:壳聚糖/β-甘油磷酸钠/0.1%京尼平混合液在37℃下约8 min能够成胶;FDA荧光染色显示BMSCs在水凝胶表面增殖良好;4种染色结果显示PRF组均呈阳性,壳聚糖组和单纯诱导组呈弱阳性;3组上清液均含有糖胺聚糖和Ⅱ型胶原,PRF组分泌量在4周内均显著高于其他两组(P均<0.05).结论:BMSCs能够在负载PRF的新型水凝胶表面生长、增殖,细胞相容性较好;该水凝胶能在一定程度上促进BMSCs成软骨分化.

关键词：骨髓间充质干细胞、壳聚糖、水凝胶、软骨组织工程、富血小板纤维蛋白

所属期刊栏目：28

分类号：R329(人体形态学)

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：291-296