小窝蛋白-1敲减对人甲状腺上皮细胞趋化因子mRNA表达的影响

摘要：

目的:探讨小窝蛋白-1(Caveolin-1)RNA干扰慢病毒对人甲状腺上皮细胞Nthy-ori 3-1趋化因子mRNA表达的影响.方法:采用分子克隆技术,根据Caveolin-1的短发夹RNA序列,构建pLKO.1-Caveolin-1重组质粒,将其或空载质粒与慢病毒包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染人胚肾上皮293T细胞.48 h后收集病毒液并感染Nthy-ori 3-1细胞,用嘌呤霉素筛选出阳性细胞,于倒置显微镜下观察Nthy-ori 3-1细胞的生长情况;荧光实时定量PCR和蛋白质印迹检测Caveolin-1的敲减效果;荧光实时定量PCR检测CXC趋化因子配体10(CXCL10)、CC趋化因子配体20(CCL20)mRNA表达水平.结果:慢病毒感染后的Nthy-ori 3-1细胞生长状态良好,Caveolin-1的表达显著降低.抑制Nthy-ori 3-1细胞中Caveolin-1表达后,其CXCL10、CCL20的mRNA表达水平显著上调.结论:成功构建Caveolin-1 RNA干扰慢病毒,Caveolin-1可能通过影响某些趋化因子的表达,参与桥本甲状腺炎的发生.

关键词：小窝蛋白-1、RNA干扰、趋化因子、桥本甲状腺炎

所属期刊栏目：28

分类号：R581.4(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81370889

在线出版日期：2018-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：209-212