脐带间质干细胞来源的外泌体抑制TGF-β1诱导的NRK-52E细胞上皮-间质转化

摘要：

目的: 探讨脐带间质干细胞来源的外泌体(exosome from human umbilical mesenchymal stem cells, hucMSC-ex)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的NRK-52E细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及其机制.方法: 体外培养大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞,TGF-β1诱导使其发生EMT作为诱导组,未经任何处理的NRK-52E细胞为对照组,TGF-β1处理24 h后加入hucMSC-ex共培养48 h为干预组.倒置显微镜下观察各组细胞形态;蛋白质印迹法检测细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原α1链(Col1A1)和TGF-β1等蛋白表达,qRT-PCR检测miR-199a表达.结果: TGF-β1诱导24 h后,细胞由卵圆形变为长梭形,且细胞密度降低.给予hucMSC-ex干预后,细胞形态恢复.与对照组相比,诱导组E-钙黏蛋白表达降低,N-钙黏蛋白,α-SMA、Col1A1和TGF-β1表达升高;干预组相关蛋白表达较诱导组发生逆转;诱导组中miR-199a表达下调,而hucMSC-ex干预组表达增加.结论: hucMSC-ex通过上调NRK-52E细胞miR199a表达逆转由TGF-β1诱导的EMT作用.

关键词：脐带间质干细胞、外泌体、上皮-间质转化、miRNA

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分类号：R393

资助基金：国家自然科学基金资助项目81272481;江苏省高校自然科学研究重大项目15KJA320001;江苏省"333工程"科研项目BRA2015399;江苏高校优秀科技创新团队项目苏教科201310号

在线出版日期：2017-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：277-281