10.13312/j.issn.1671-7783.y170025
CD137-CD137L信号通过CaM-CaN通路调控小鼠血管平滑肌细胞NFATc1表达
目的:探讨CD137-CD137L信号是否通过钙调蛋白-钙调神经磷酸酶(Calmodlin-Calcineurin,CaM-CaN)通路调控小鼠血管平滑肌细胞活化T细胞核因子c1(nuclear factor of activated T cells c1,NFATc1)的表达.方法:采用改良组织贴块法原代培养小鼠血管平滑肌细胞.实验分两部分,第一部分细胞分组:对照组、CD137刺激组(激动型CD137抗体10 μg/mL)和CD137抑制组(抑制型CD137抗体10 μg/mL预孵30 min后+ 激动型CD137抗体10 μg/mL);第2部分细胞分组:对照组、CD137刺激组(激动型CD137抗体10 μg/mL)、siCaM组(si-CaM+CD137刺激组)和siCaN组(si-CaN+CD137刺激组).分别采用蛋白质印迹和RT-PCR检测平滑肌细胞CaM、CaN及NFATc1的蛋白和mRNA表达水平.结果:(1) 蛋白质印迹和RT-PCR结果显示,与对照组相比,CD137刺激组小鼠平滑肌细胞CaM、CaN及NFATc1表达明显升高(P<0.05);与CD137刺激组相比,CD137抑制组CaM、CaN及NFATc1表达显著降低(P<0.05).(2)通过si-RNA技术分别沉默CaM和CaN后,与CD137刺激组相比,siCaM组CaM、CaN及NFATc1表达水平明显降低(P<0.05);siCaN组的CaM无明显改变(P>0.05),而CaN及NFATc1表达明显降低(P<0.05).结论:CD137-CD137L信号可能通过CaM-CaN通路调控NFATc1的表达.
钙调蛋白、钙调神经磷酸酶、活化T细胞核因子c1、CD137-CD137L
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R393
国家自然科学基金资助项目81370409,81670405;江苏省自然科学基金资助项目BK20161355
2017-05-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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