人 TSHR289基因重组腺病毒的制备与鉴定

摘要：

目的：制备腺病毒 AdE－GFP－hTSHR289，并进行鉴定。方法：限制性内切酶 NotⅠ和 XhoⅠ双酶切分别处理pBluescript Ⅱ SK（＋）－hTSHR289和 pAdTrack－CMV，回收纯化目的片段 hTSHR289，将其插入至线性化的 pAdTrack－CMV 大片段中；限制性内切酶 PmeⅠ线性化 pAdTrack－hTSHR289与大肠埃希菌 BJ5183中 pAdEasy－1质粒同源重组，限制性内切酶 PacⅠ酶切验证；将阳性重组质粒转染至人胚肾293A 细胞，以包装获得表达 hTSHR289的腺病毒 AdE－GFP－hTSHR289；TCID50法检测重组腺病毒滴度。结果：成功地将 hTSHR289重组至腺病毒载体，获得携带 hTSHR289重组腺病毒载体，包装出携带 hTSHR289基因的腺病毒，滴度达3．5×109 pfu／mL。结论：制备得到携带 hTSHR289的重组腺病毒。

关键词：促甲状腺激素受体、腺病毒、病毒滴度

分类号：R392.1

资助基金：国家自然科学基金资助项目31470881；教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20133227110008；江苏省卫生厅医学科研项目Z201313

在线出版日期：2016-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：324-327