Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶抑制VEGFR2介导的人胃癌HGC-27细胞增殖

摘要：

目的:探讨Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(typeⅡcGMP-dependent protein kinase,PKGⅡ)对血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)介导的人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制.方法:应用编码PKGⅡcDNA的腺病毒(Ad-PKGⅡ)感染HGC-27细胞,使其高表达PKGⅡ,并以特异性激动剂8-pCPT-cGMP激活PKGⅡ.应用血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)激活VEGFR2.MTT法检测细胞增殖;蛋白质印迹法检测p-VEGFR2、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-PKB/p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK1/2)表达;免疫共沉淀法检测PKGⅡ与VEGFR2的结合;免疫沉淀法联合蛋白质印迹法检测PKGⅡ对VEGFR2丝氨酸/苏氨酸(Serine/Threonine,Ser/Thr)的磷酸化作用.结果:VEGF-A可促进HGC-27细胞增殖,并诱导胞内p-VEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平明显升高;以Ad-PKGⅡ感染HGC-27细胞使其高表达PKGⅡ并激活后,VEGF-A引起的细胞增殖受到明显抑制,p-VEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平显著降低;PKGⅡ可与VEGFR2相互作用,使后者丝氨酸/苏氨酸磷酸化.结论:激活的PKGⅡ可通过使VEGFR2发生丝氨酸/苏氨酸磷酸化抑制人胃癌HGC-27细胞的VEGFR2酪氨酸磷酸化,进而抑制其下游的增殖相关信号转导,最终抑制该细胞的增殖.

关键词：血管内皮生长因子受体-2、Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶、细胞增殖、胃癌HGC-27细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R329.28(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81272755,81201959;江苏省高校自然科学研究计划资助项目12KJB310001;江苏大学高级专业人才科研启动基金资助项目11JDG114;江苏省博士后科研资助计划1401144C;中国博士后科学基金资助项目2014M561599

在线出版日期：2016-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：108-112,118