FAAP20和RAD51C基因敲减对肺癌细胞顺铂敏感性的影响

摘要：

目的:研究敲减范可尼贫血(FA)通路上游FAAP20和下游RAD51C基因对人肺癌Calu-1细胞株顺铂敏感性的影响.方法:合成针对FAAP20和RAD51C基因的siRNA(FAAP20-siRNA和RAD51C-siRNA),用脂质体转染试剂将他们分别和同时转染于人肺癌Calu-1细胞株.蛋白质印迹法检测siRNAs转染后细胞FAAP20和RAD51C蛋白的表达以验证转染效率,并检测FANCD2蛋白单泛素化水平;CCK-8法测定转染前后的细胞增殖率;Annexin V/PI流式细胞术测定转染前后细胞凋亡率;免疫荧光法观察转染前后细胞核内FANCD2蛋白核聚小体的形成.结果:与转染前比较,转染FAAP20-siRNA和RAD51C-siRNA后经顺铂处理的Calu-1细胞FAAP20和RAD51C蛋白表达均明显降低,表明转染有效.敲减FAAP20基因后顺铂诱导的FANCD2蛋白单泛素化水平降低,核聚小体形成减少,而RAD51C基因敲减对FANCD2蛋白单泛素化和核聚小体形成并无明显影响.敲减FAAP20或RAD51C基因均可增强顺铂诱导的细胞增殖抑制和细胞凋亡作用,同时共敲减这两个基因则进一步增强顺铂对Calu-1细胞的杀瘤效应.结论:敲减FAAP20和RAD51C基因可增加Calu-1细胞对顺铂的敏感性,FAAP20和RAD51C基因的DNA损伤修复功能并不完全作用在同一条路径(范可尼贫血通路).

关键词：FAAP20、RAD51C、FANCD2、siRNA、顺铂、肺癌细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R730.54(肿瘤学)

在线出版日期：2016-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：5-10,16