病毒载体介导β折叠阻断肽的表达及其对β淀粉样蛋白神经毒性的抑制作用

摘要：

目的：通过病毒载体转染体外培养的海马神经元，观察后者表达分泌性的β折叠阻断肽（β-sheet breaker peptide，BSB）的生物活性。方法：采用分子克隆技术构建编码神经营养素4（neurotrophin-4，NT4）信号肽-BSB 融合基因的重组腺伴随病毒（recombinant adeno-associated vrius，rAAV）载体，AAV 在包装细胞系293细胞中进行包装，蔗糖梯度离心法纯化病毒颗粒，斑点杂交法测定重组病毒滴度。MTT 检测及电镜观察 BSB 的生物学效应。结果：成功构建 pSSHG／NT4-BSB 质粒载体，纯化后获得滴度为3．6×1012～1．8×1013／mL 的病毒颗粒。通过病毒感染培养的神经元分泌表达的 BSB 有效地抑制了β-淀粉样蛋白（Aβ）的纤维化聚集，明显降低了 Aβ在体外的神经元毒性。结论：采用 AAV 载体介导的 BSB 短肽的分泌表达在体外培养的海马神经元中显示了良好的生物活性。

关键词：阿尔茨海默病、β折叠阻断肽、信号肽、腺伴随病毒

分类号：R393;R749.16

在线出版日期：2015-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：212-216