10.13312/j.issn.1671-7783.y140261
一步法宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒 DNA 抽提方法的建立
目的:建立一步法抽提宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)DNA 的方法。方法:收集200例宫颈脱落细胞标本,分别采用柱式法 DNA 提取试剂盒和一步法抽提 HPV-DNA,用微量核酸测定仪测定 DNA 的纯度和浓度,采用 PCR 反向斑点杂交(PCR-RDB)法进行 HPV-DNA 分型检测。结果:柱式法抽提的 DNA 纯度和浓度分别为(1.91±0.14)μg/mL 和(139.78±18.21)μg/mL,一步法抽提的 DNA 纯度和浓度分别为(1.86±0.19)μg/mL和(124.36±17.35)μg/mL,两种方法的 DNA 纯度和浓度差异均有统计学意义(P <0.01)。柱式法和一步法 HPV 分型的总阳性率、单一感染率、多重感染率分别为17.5%(35/200)、7.5%(15/200)、10%(20/200)和17.5%(35/200)、8%(16/200)、9.5%(19/200),两法一致性检验 Kappa 值为0.886,结果具有较好的一致性。结论:一步法提取宫颈脱落细胞 HPV-DNA 步骤简单,DNA 质量高,完全适用于临床样本的 HPV 分型检测。
聚合酶链反应、反向斑点杂交、人乳头瘤病毒、DNA 提取、一步法、分离方法
Q781(基因工程(遗传工程))
2014-12-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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