一步法宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒 DNA 抽提方法的建立

摘要：

目的：建立一步法抽提宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）DNA 的方法。方法：收集200例宫颈脱落细胞标本，分别采用柱式法 DNA 提取试剂盒和一步法抽提 HPV-DNA，用微量核酸测定仪测定 DNA 的纯度和浓度，采用 PCR 反向斑点杂交（PCR-RDB）法进行 HPV-DNA 分型检测。结果：柱式法抽提的 DNA 纯度和浓度分别为（1．91±0．14）μg／mL 和（139．78±18．21）μg／mL，一步法抽提的 DNA 纯度和浓度分别为（1．86±0．19）μg／mL和（124．36±17．35）μg／mL，两种方法的 DNA 纯度和浓度差异均有统计学意义（P <0．01）。柱式法和一步法 HPV 分型的总阳性率、单一感染率、多重感染率分别为17．5％（35／200）、7．5％（15／200）、10％（20／200）和17．5％（35／200）、8％（16／200）、9．5％（19／200），两法一致性检验 Kappa 值为0．886，结果具有较好的一致性。结论：一步法提取宫颈脱落细胞 HPV-DNA 步骤简单，DNA 质量高，完全适用于临床样本的 HPV 分型检测。

关键词：聚合酶链反应、反向斑点杂交、人乳头瘤病毒、DNA 提取、一步法、分离方法

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2014-12-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：491-494