siRNA抑制FANCF基因增加肺癌细胞对顺铂的敏感性

摘要：

目的:研究抑制FA/BRCA途径中的范可尼贫血相关蛋白F(FANCF)基因在增加人肺腺癌CALU-1细胞株对顺铂敏感性中的作用.方法:设计靶向于FANCF基因的3条siRNAs (FANCF-siRNAs),用脂质体转染试剂将其分别转染于CALU-1肺癌细胞株,RT-PCR检测转染后24 h FANCF mRNA的变化;筛选转染效率最高的siRNA片段.蛋白质印迹法检测经顺铂处理的CALU-1细胞株转染siRNA前后FANCF蛋白表达及FANCD2蛋白单泛素化水平;免疫荧光法测定胞核中FANCD2蛋白核聚小体的形成;CCK-8法测定转染siRNA前后的细胞增殖率变化.结果:与转染前比较,CALU-1肺癌细胞株转染FANCF-siRNA后FANCF蛋白表达明显下降,FANCD2蛋白单泛素化水平和核聚小体形成降低,细胞增殖率显著下降.结论:应用siRNA转染技术沉默FANCF基因可明显增加肺癌细胞对顺铂的敏感性,提示在肺癌靶向治疗策略中,FA/BRCA途径中的FANCF基因很可能是一个潜在的分子靶标.

关键词：范可尼贫血相关蛋白F、FA/BRCA途径、siRNA、顺铂、敏感性

所属期刊栏目：24

分类号：R392.28;R979.1

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：195-200