psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒的构建及在真核细胞中的表达
目的:以psiCHECK-2质粒为骨架,构建带有远红外荧光蛋白mLumin和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)的双荧光蛋白报告基因质粒psiCHECK-2-eGFP-mLumin.方法:PCR扩增mLumin和eGFP基因片段,分别取代海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶插入psiCHECK-2质粒中,构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin 双荧光蛋白报告基因重组质粒mLumin.通过测序验证插入序列,并将此质粒转入HEK293T细胞,分别用PCR和荧光显微镜鉴定eGFP和mLumin在细胞中的表达.结果:DNA测序结果证实连接在psiCHECK-2质粒上的eGFP和mLumin基因序列与基因库中的序列一致.将psiCHECK-2-eGFP-mLumin质粒转染HEK293T细胞,能成功表达eGFP和mLumin蛋白.结论:成功构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒,且可在真核细胞中表达.
psiCHECK-2、增强型绿色荧光蛋白、mLumin、HEK293T
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R393
国家自然科学基金资助项目30671984;江苏省普通高校研究生科研创新计划资助项目CXLX12_0675;国家级大学生创新创业训练计划项目和江苏省高等学校大学生实践创新训练计划重点资助项目2012JSSPITP1220
2013-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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