幽门螺杆菌cag1基因缺陷株的构建与鉴定

摘要：

目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关基因致病岛(cytotoxin associated gene pathogenicity island,cag PAI)中的第1个编码基因hp0520/cag1基因缺陷株,为进一步研究cag1基因在cag PAI中的功能奠定基础.方法:使用同源重组技术,通过PCR扩增出cag1基因两侧同源臂序列,酶切纯化后分别连接于带卡那霉素抗性标志的载体两端,构建成cag1基因自杀质粒.将该质粒通过电穿孔导入受体野生株中,通过抗性筛选与PCR验证得到cag1基因缺陷株,与人胃上皮GES-1细胞共培养后,与野生株比较,观察细胞形态变化.结果:成功敲除H.pylori cag1基因,获得cag1基因缺陷株;与野生株相比,cag1基因缺陷株破坏细胞的能力降低.结论:成功获得幽门螺杆菌cag1基因缺陷株;cag1基因缺失后H.pylori对GES-1细胞的毒力减弱.

关键词：幽门螺杆菌、细胞毒素相关基因致病岛、自杀质粒、基因缺陷、cag1

所属期刊栏目：23

分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81271795;高等学校博士学科点专项科研基金资助项目201232271 10008;江苏省临床医学专项资金资助项目BL2012047;江苏省普通高校研究生科研创新计划项目CX10B_280Z

在线出版日期：2013-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：369-372,376