EvaGreen 染料法实时定量PCR检测急性髓系白血病PRAME基因转录本

摘要：

目的:采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)法检测急性髓系白血病(AML)中黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)基因转录本,初步评价其在AML中的临床意义. 方法:设计PRAME基因引物,建立扩增PRAME基因转录本的EvaGreen染料法RQ-PCR法,对PRAME转录本克隆质粒进行扩增,评价其特异性、重复性和灵敏性.并对10例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测. 结果:所建立的EvaGreen RQ-PCR法具有良好的特异性,最低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但其重复性差,而108～102拷贝/μl阳模的重复性良好.10例初诊AML患者PRAME转录本绝对含量为4.91×102～8.07×105拷贝/50ng(中位7.26×103拷贝/50ng),ABL标化后的相对含量为4.42%～13 170.01%(中位67.98%).而对照组8例缺铁性贫血患者中PRAME转录本相对含量为 0.00%～0.01% (中位0).1例AML患者诱导缓解后PRAME转录本下降,复发时又明显升高.结论: EvaGreen染料法RQ-PCR检测PRAME转录本方法敏感可靠,可用于AML患者临床监测.

关键词：实时定量PCR、EvaGreen染料、PRAME基因、急性髓系白血病

所属期刊栏目：19

分类号：R446.6(诊断学)

资助基金：江苏省医学重点人才资助项目RC2007035;镇江市社会发展基金资助项目SH2006032

在线出版日期：2009-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：401-404