磁珠捕获技术在定量液相杂交中的应用

摘要：

目的:在建立新的微生物DNA液相定量杂交法的基础上,检测了10株临床分离菌间染色体DNA的杂交率并与固相板法进行比较,为该法的推广应用奠定了基础.方法:根据SYBR Greenl能够特异性结合双股DNA的特性,借助链霉亲和素包被磁珠的分离技术和偏振荧光探测方法的敏感性,分别捕获和检测游离于杂交液中两种DNA形成的杂交体,计算两者间的同源性.结果:本法测得的5株肠杆菌科标准菌株和临床分离株种间或科/属间的杂交率与发表值一致.提示该法可用于各种细菌间的同源性测定,且结果稳定、可靠.结论:偏振荧光法定量测定细菌染色体的同源性,具有简便、快速、敏感、特异等优点,可以避免微孔板定量杂交法中因DNA脱板所造成的误差,便于临床推广应用.

关键词：磁珠、偏振荧光、液相杂交、细菌染色体

所属期刊栏目：13

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：江苏省自然科学基金BK200029;江苏省333新世纪科学技术带头人培养工程

在线出版日期：2003-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：285-288