利用QIAxcel Connect全自动DNA/RNA分析系统鉴定豪猪血蜱和长角血蜱

摘要：

豪猪血蜱和长角血蜱携带病原体种类不同,准确对其鉴定是防控相关蜱媒传染病的基础.传统的形态学鉴定需要研究者具有较高的专业水平,且鉴定结果受标本的发育阶段和完整性等因素影响.针对分子标记的PCR扩增和产物测序,能准确鉴定蜱种,但耗时费力.本研究将扩增后的豪猪血蜱和长角血蜱的16S rRNA基因片段,经毛细管凝胶电泳后,两者扩增产物在胶图上出现单一且明显的分离条带,其中长角血蜱基因片段大于豪猪血蜱.两个蜱种的目的基因测序结果显示,长角血蜱455 bp,豪猪血蜱453 bp.将豪猪血蜱和长角血蜱的16S rRNA基因片段扩增产物等量混合,并将两者混合物设为鉴定Size Marker,对长角血蜱16S rRNA基因片段赋值455 bp,对豪猪血蜱的赋值453 bp.经毛细管凝胶电泳分析,豪猪血蜱和长角血蜱分子量被准确测定,且基因条带明显分离.结果表明,采用16S rRNA的PCR扩增和产物毛细管电泳相结合的方法,在产物不测序的情况下,可快速、准确鉴定形态相近的豪猪血蜱和长角血蜱,此外,该法亦可推广到其他2个及以上形态难以鉴定物种的区分.

关键词：毛细管凝胶电泳、物种鉴定、豪猪血蜱、长角血蜱

所属期刊栏目：30

分类号：TP391;R319;F830.49

资助基金：南昌市医疗技术支撑计划重点项目;江西省重点研发计划一般项目;江西省重点研发计划

在线出版日期：2023-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：18-24