一种荧光RPA方法鉴定伊蚊的研究

摘要：

本研究旨在建立一种基于荧光RPA技术的伊蚊鉴定方法.以白纹伊蚊和埃及伊蚊为例,分别根据其rDNA-ITS2序列设计了特异性RPA引物和探针,通过基础RPA方法进行引物筛选,扩增产物测序后在NCBI数据库中进行Blast比对分析,并与COI基因序列分析结果比较,以验证该方法的准确性.然后,进行特异性、灵敏度、重复性实验.结果显示,本研究建立的荧光RPA方法的鉴定结果与基于COⅠ基因序列的分析鉴定结果一致.该方法在39℃条件下20 min即可完成检测,与刺扰伊蚊、背点伊蚊、三带喙库蚊、中华按蚊、常型曼蚊DNA均无交叉反应,对目的DNA的检测下限为0.01 ng/μL,3个平行的变异系数值均<5％.结果表明,本研究建立的伊蚊荧光RPA鉴定方法,特异性强、灵敏度高、重复性好,操作简便、快速,适合于蚊虫DNA的分子分类鉴别检测.

关键词：伊蚊、荧光RPA、分类鉴定

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资助基金：十三五国家重点研发计划;十三五科技重大专项

在线出版日期：2021-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：244-250