安徽三界地区恙虫病东方体SJ2株基因重组抗原的制备及活性分析

摘要：

为制备恙虫病东方体SJ2株基因重组抗原和恙虫病血清学诊断备选抗原,根据恙虫病东方体56 kDa外膜蛋白基因序列设计特异性引物,经PCR扩增东方体SJ2株56 kDa型蛋白羧基端部分基因,序列测定并用软件Bioedit与我国主要东方体流行株56kDa蛋白进行氨基酸序列比对分析.然后克隆至载体pET-28a并在BL21菌体中诱导表达,通过His镍柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western-blot鉴定分析.结果显示,成功扩增出恙虫病东方体SJ2株56 kDa蛋白708 bp基因片段,氨基酸序列比对显示,该截短蛋白含2个保守区和1个可变区.经IPTG诱导表达后,蛋白电泳在27 kDa处出现明显目标条带.Western-blot结果显示,该蛋白与恙虫病病人血清有特异性免疫反应,与正常人血清不反应.结果表明,诱导表达的重组56 kDa蛋白具有良好的免疫原性,可能备选为恙虫病诊断抗原用于恙虫病血清学检测.

关键词：恙虫病东方体、克隆表达、免疫分析、诊断

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资助基金：国家自然科学基金面上项目;江苏省自然科学基金;国家科技重大专项子课题;军队后勤重大项目

在线出版日期：2021-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：213-217