白纹伊蚊(广州株)唾液Aalb_56ku基因克隆表达与免疫原性分析

摘要：

探讨Aalb_56 ku基因在白纹伊蚊(广州株)不同组织中的表达差异;对唾液腺中Aalb_56 ku基因进行克隆表达并探索其免疫原性.采用实时荧光定量RT-PCR法对雌蚊中肠、脂肪体、唾液腺不同组织中Aalb_56 ku基因的表达差异进行分析.针对Aalb_56 ku基因序列设计特异性引物,以唾液腺RNA为模板获得56 ku全长基因序列,构建重组质粒并测序,将测序序列进行生物信息学和抗原表位预测分析.IPTG诱导表达,亲和层析法纯化重组蛋白;制备小鼠特异性抗Aalb_56 ku蛋白抗血清.结果显示,Aalb_56 ku在白纹伊蚊(广州株)唾液腺(SG)中高表达.克隆所获唾液腺56 ku基因全长1 593 bp,可编码530个氨基酸,信息学分析提示该基因含有信号肽序列,等电点为8.40,抗原表位预测提示含有23个表位.pET30a(+)-56 ku重组质粒可表达约56 kDa大小的融合蛋白,且呈包涵体形式表达,Western blotting鉴定具有His标签.纯化蛋白免疫Balb/c小鼠后可获得1:100效价的特异性抗血清,提示该重组蛋白具有一定的免疫原性.

关键词：白蚊伊蚊、Aalb_56ku基因、重组蛋白、免疫原性

所属期刊栏目：24

分类号：R57;R38

资助基金：国家自然科学基金项目81060138,81260260;贵州省省长基金项目黔省专合字200748号

在线出版日期：2017-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：126-131