弓形虫gra14基因真核表达载体的构建及其免疫保护性研究

摘要：

构建弓形虫致密颗粒蛋白14 (GRA14)的真核表达质粒,研究其对小鼠的免疫保护力.扩增弓形虫RH强毒株gra14基因并构建pVAX1-gra 14真核表达质粒,免疫BALB/c小鼠.60只小鼠随机分成4组,实验组小鼠肌肉注射100 μg pVAX1-gra14质粒,对照组分别注射PBS(100 μL/只)和pVAX1空质粒(100μg/只),空白对照不作处理.共免疫3次,每次间隔14d.ELISA法检测免疫后IgG、亚型抗体和细胞因子水平.攻击实验后比较小鼠生存率,分析pVAX1-gra 14的免疫保护作用.结果显示成功扩增gra14基因并构建真核表达载体,Western blot结果显示目的基因成功表达并具有反应原性,pVAX1-gra14免疫后小鼠的IgG抗体水平显著升高,IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的表达量分别为652.47±14.55、455.53±7.88、228.13±14.51和252.13±14.20 pg/mL,同时免疫后实验组小鼠的生存时间相比对照组显著延长,平均生存时间为14.1 ±1.3 d.以上结果表明,pVAX1-gra14能够诱导特异细胞免疫和体液免疫反应,产生一定的免疫保护作用.

关键词：刚地弓形虫、致密颗粒蛋白14、DNA疫苗、免疫

所属期刊栏目：22

分类号：R39;R38

资助基金：浙江省科技计划项目2013C33195,2014C33230,2015C37108;浙江省医学重点学科群建设XKQ-010-001,XKQ-009-003;浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目C31001

在线出版日期：2016-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：205-211