旋毛虫Hsp70与Ts87融合蛋白的构建表达及鉴定

摘要：

本文构建并表达了旋毛虫热休克蛋白70（Ts－Hsp70）与排泄分泌抗原Ts87的融合蛋白，并对融合蛋白进行纯化和免疫学鉴定。本研究采用限制性内切酶EcoRⅠ酶切位点将目的基因Ts－Hsp70与Ts87相连接，插入pET28－a （＋）质粒，转入大肠埃希菌BL21（DE3）中诱导表达、纯化，获得的融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87用Western blot的方法鉴定。经PCR、酶切鉴定、测序分析，结果显示，目的基因片段大小为2721 bp，构建的重组质粒与预期相符。经IPTG诱导表达，通过镍离子柱层析纯化复性后得到可溶的融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87，其相对分子质量约为100 kDa； Western blot结果显示，该蛋白可被抗His标签单抗、 rTs－Hsp70免疫血清、 rTs87免疫血清识别。以上结果表明，本研究成功构建并表达了融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87，为进一步研究rTs－Hsp70－Ts87的免疫保护性，开发新的有效抗旋毛虫病的疫苗奠定基础。

关键词：旋毛虫、融合蛋白、热休克蛋白70、排泄分泌抗原、疫苗

分类号：R3 ;S85

资助基金：国家传染病重大专项No．2012ZX10004220－012；北京市自然科学基金青年基金资助项目7154183

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6