弓形虫 SAG2和 GRA2基因疫苗的免疫保护研究

摘要：

DNA疫苗是将编码抗原的基因插入载体质粒中构成重组体，直接接种机体，在接种部位摄取表达并达到抗感染目的的一种疫苗。 pCMV-Taq2B载体具有人巨细胞病毒（ Human cytomegalovirus， CMV）高效启动子／增强子序列，可使目的基因在真核细胞中高水平稳定表达成为DNA疫苗载体。构建pCMV-Taq2B-Surface antigen 2（表面膜抗原2）（ pSAG2）、 pCMV-Taq2B-Dense granule protein 2（致密颗粒蛋白2）（pGRA2）及 pCMV-Taq2B-SAG2-GRA2（ pSAG2-GRA2） DNA 疫苗并研究其免疫保护效果。将 pSAG2、pGRA2、 pSAG2-GRA2 DNA疫苗（实验组）、磷酸盐缓冲液（Phosphate buffered saline， PBS）、 pCMV-Taq2B空质粒（对照组）分别肌肉注射BALB／c小鼠， ELISA法检测血清IgG抗体水平。末次免疫后第28 d，各组每只小鼠经腹腔注射弓形虫速殖子1000个，观察小鼠的生存时间。结果显示单基因疫苗pSAG2、 pGRA2和双基因疫苗pSAG2-GRA2免疫组均能诱导产生特异性IgG抗体，且于末次免疫后第28 d达到最高值，此时单基因疫苗pGRA2（0.382±0.66）和双基因疫苗pSAG2-GRA2（0.548±0.137）免疫组吸光度值显著高于PBS （0.137±0.016）或pCMV-Taq2B （0.135±0.010）对照组吸光度值。免疫单基因疫苗pSAG2（14.3±1.8）、 pGRA2组（13.5±2.1）小鼠存活时间（d）明显长于PBS （4.3±1.6）及pCMV-Taq2B组（4.1±1.3），且双基因疫苗 pSAG2-GRA2组（19.6±2.4）小鼠存活时间明显长于单基因疫苗 pSAG2组及pGRA2组。弓形虫双基因疫苗pSAG2-GRA2能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫，其免疫保护性优于pSAG2、 pGRA2单基因疫苗。

关键词：刚地弓形虫、表面膜抗原2、致密颗粒蛋白2、基因疫苗

分类号：R38;R53

资助基金：国家自然科学基金项目81301449，81300368；广东省高等学校学科与专业建设专项资金项目学科科研类项目2013LYM＿0034；广东省医学科研基金项目B2013309；广东医学院回国资助项目B2012077

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：227-232