直接PCR法检测血液中伊氏锥虫感染

摘要：

为建立伊氏锥虫动基体DNA(Kinetoplast DNA,kDNA)的PCR扩增技术,血液直接PCR法检测伊氏锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片段的PCR扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的滤纸血标本直接PCR检测伊氏锥虫.结果发现,PCR扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364 bp,能检测的最小DNA量是0.06 pg,与布氏锥虫、活动锥虫没有交叉反应.应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提,直接PCR能检测感染小鼠的早期滤纸血样本,敏感性高于镜检法.本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性,方法快捷,可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查.

关键词：伊氏锥虫、直接PCR、动基体DNA(kDNA)、血液

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：人事部留学回国人员科技活动择优基金A30401E

在线出版日期：2007-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：204-207