细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31的GST融合蛋白原核表达及纯化

摘要：

目的:构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒,表达及纯化EgA31/GST融合蛋白,为疫苗的研究奠定基础.方法:PCR扩增EgA31cDNA,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切,然后亚克隆入pGEX-5X-3质粒,转化BL21宿主菌,IPTG诱导重组质粒的表达,亲和层析纯化表达产物,Bradford法测定重组蛋白含量,用SDS-PAGE和Westernblot进行分析鉴定.结果:SDS-PAGE显示分离纯化的EgA31/GST融合蛋白为45kDa,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确.EgA31/GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在66kDa处特异性反应.结论:EgA31/GST融合蛋白获得高效表达,并成功纯化,初步实验证明具有良好的免疫原性,可用于进一步疫苗的免疫注射实验.

关键词：细粒棘球绦虫、EgA31融合蛋白、疫苗

所属期刊栏目：10

分类号：R38(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30170710

在线出版日期：2003-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：134-138