微小核糖核酸-155对肝癌细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的影响

摘要：

目的 探究微小核糖核酸(miR)-155 靶向蛋白酪氨酸磷酸酶非受体 21 型(PTPN21)调控磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响.方法 体外培养Huh7 人肝癌细胞并通过miR-155 沉默慢病毒(sh-miR-155)转染下调miR-155.实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Huh7 细胞miR-155 沉默效果,获得稳转细胞株后将细胞株随机分为:Blank 组(正常Huh7 细胞)、shNC组(Huh7 细胞+miR-155 空载体)、sh-miR-155 组(Huh7 细胞+miR-155 沉默)、sh-miR-155+Recilisib组(Huh7 细胞+miR-155 沉默+PI3K-AKT激动剂)、shNC+Recilisib 组(Huh7 细胞+miR-155 空载体+PI3K-AKT激动剂).双荧光素酶实验检测PTPN21 是否为miR-155 的下游;溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术测定各组细胞凋亡水平;Transwell实验分析各组细胞侵袭与迁移能力;蛋白质印迹检测各组PTPN21、通路相关蛋白PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase-3 表达变化差异.结果 sh-miR-155 组中miR-155 的表达水平低于Blank组及shNC组(P＜0.000 1),miR-155 在Blank组及shNC组表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).MTT结果显示,sh-miR-155 组中Huh7 细胞在 2、3、4、5 d时A值均低于Blank组及shNC组(P＜0.000 1),而Blank组与shNC组差异无统计学意义(P＞0.05);sh-miR-155 组在 2、3、4、5 d时A值低于sh-miR-155+Recilisib组及shNC+Recilisib组(P=0.005 2,P＜0.000 1),而sh-miR-155+Recilisib组在 2、3、4、5 d时A值低于shNC+Recilisib组(P＜0.0001).Blank组与shNC组迁移及侵袭细胞数差异无统计学意义(P＞0.05),激活PI3K-AKT信号通路后,与Blank组相比,shNC+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力显著增加(P＜0.0001).相反,沉默miR-155 后Huh7 细胞的迁移及侵袭细胞数明显低于Blank组及shNC组(P＜0.000 1),而PI3K激动剂逆转了这一现象,与sh-miR-155 组相比,sh-miR-155+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力增强(P=0.000 2).慢病毒转染Huh7 人肝癌细胞以沉默miR-155,下调miR-155 抑制PTPN21 调控PI3K-AKT信号通路从而抑制肝癌细胞的侵袭、迁移、增殖能力,促进肝癌细胞凋亡.结论 miR-155 通过靶向PTPN21 调控PI3K-AKT信号通路抑制肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖.miR-155 可能是未来肝癌治疗潜在靶点.

关键词：肝癌、微小核糖核酸-155、蛋白酪氨酸磷酸酶非受体21型、磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B

所属期刊栏目：33

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省卫生健康委省级医学重点学科建设项目

在线出版日期：2024-02-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：44-51