Cav1.2钙通道GST-CT1蛋白片段与胞浆钙调蛋白提取纯化的比较

摘要：

目的 对比分析心肌Cav1.2钙通道片段GST-CT1融合蛋白与胞浆钙调蛋白(calmodulin,CaM)提取与纯化方法的异同.方法 将pGEX-6p-3/CT1和pGEX-6p-3/CaM重组质粒转入E.coli BL21菌株,筛选得到转化成功的菌株并用IPTG诱导其表达,GS-4B beads分离纯化,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定目的蛋白及其相对纯度,Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白和CaM蛋白的生物学活性.结果 采用超声破碎法,应用N-laurylsarcosine和Triton X-100处理后提取的GST-CT1融合蛋白浓度和纯度显著高于未用两者处理的对照组,而N-laurylsarcosine和Triton X-100对胞浆蛋白CaM的提取和纯化无明显影响.结论 细胞膜通道蛋白GST-CT1的提取和纯化方法与胞浆蛋白CaM存在明显差别.

关键词：融合蛋白、胞浆蛋白、钙通道、钙调蛋白

所属期刊栏目：22

分类号：Q814.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2016-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：121-123