密度梯度离心法结合贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞

摘要：

目的 研究密度梯度离心法结合贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)及不同首次换液时间对细胞增殖的影响,探索一种简单易行、扩增效率高的方法.方法 3月龄雄性SD大鼠提取原代BMSCs,密度梯度离心法结合贴壁法分离培养,并应用3组不同首次半量换液时间( 24h,48h,72h)进行培养传代,测定生长曲线和细胞的存活率；免疫细胞化学染色分析细胞表面抗原CD44和CD166的表达.结果 分离的BMSCs 48h后细胞完全贴壁生长,呈形态均一的纺锤形单核细胞状,第3代细胞培养1w后呈长梭型,呈平行排列生长.48h半量换液组细胞增殖活性及生存率最高,其次为24h和72h组；表面标志物CD44和CD166均呈阳性.结论 联合应用密度梯度离心法及贴壁筛选法可成功分离BMSCs,且效率高、纯度高,48h首次半量换液更适合BMSCs的生长繁殖.

关键词：骨髓间充质干细胞、培养、大鼠

所属期刊栏目：18

分类号：R322.2(人体形态学)

资助基金：辽宁医学院青年科技启动基金Y2010Z006

在线出版日期：2012-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：438-441