hLKB1基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

摘要：

目的 构建hLKB1真核表达载体,证实融合蛋白在胃癌细胞内的表达及定位.方法 提取胃正常黏膜上皮细胞GES-1的总mRNA并进行反转录.以反转录的cDNA为模板PCR扩增hLKB1全长编码基因,克隆至pCDNA3.1/flag的真核表达载体中.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌SGC-7901细胞中,分别利用Westernblot和激光共聚焦扫描显微技术检测其表达和在胃癌细胞中的定位.结果 hLKB1全长基因序列克隆到真核表达载体中,酶切鉴定片段为1300bp.Western blot检测到真核转染的Flag-hLKB1在胃癌SGC-7901细胞表达,条带约为50kD,免疫荧光显示蛋白广泛定位于细胞质和细胞核内.结论 成功构建了hLKB1基因真核表达载体,并验证其在胃癌细胞表达.

关键词：LKB1基因、融合蛋白、蛋白质印迹、免疫荧光、胃癌SGC-7901

所属期刊栏目：18

分类号：R329.21(人体形态学)

资助基金：国家自然基金资助项目NSFC-81170561

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：320-322