抗人大肠癌单链抗体与绿色荧光蛋白融合基因的构建和表达

摘要：

目的 构建并表达绿色荧光蛋白(GFP)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,产生具有荧光的抗体.方法 将鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的基因克隆到pET28a (+)-GFP的表达载体,转化到大肠杆菌E.coli BL21中进行融合基因ND- 1-scFv/GFP诱导表达.Ni-NTA亲和层析对表达产物进行分离、纯化,免疫印迹和荧光显微镜方法验证融合蛋白的表达.结果 ND-1scFv被克隆到表达载体pET28a(+)-GFP中,诱导表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量为58kDa.SDS-PAGE灰度扫描结果显示纯化后的蛋白纯度为90％,荧光显微镜检测显示,表达有目的蛋白的大肠杆菌BL21具有明显的绿色荧光.结论 成功构建并表达融合基因ND-1-scFv/GFP,为该单抗的肿瘤特异成像研究奠定了基础.

关键词：ND-1单克隆抗体、单链抗体Fv、绿色荧光蛋白、大肠癌

所属期刊栏目：18

分类号：Q936;R735.3+4(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目20875103

在线出版日期：2012-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：208-211