BHA和β-ME对表观修饰后的NIH/3T3细胞向神经方向诱导的实验研究

摘要：

目的 通过联合应用表观修饰药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)和曲古抑菌素A(Trichstatin A,TSA)对NIH/3T3细胞进行重编程,应用β-羟基酸(beta hydroxy acid,BHA)和β-巯基乙醇(β -mercaptoethanol,β-ME)进一步诱导,以期表达与神经细胞密切相关的基因.方法 应用流式细胞技术检测实验组(4.5 μM 5-aza-dC+0.35μMTSA+1mMβ -ME+200 μM BHA作用后的NIH/3T3细胞)和对照组中NIH/3T3细胞的DNA甲基化水平.应用RT-PCR的方法检测Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的表达,免疫细胞化学染色检测巢蛋白(nestin)和神经丝轻链(neurofilament light chain,NF-L)的表达情况.结果 实验组NIH/3T3细胞DNA甲基化水平较对照组明显降低,细胞均呈现出Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4基因的阳性表达.经过BHA和β-ME诱导后,NIH/3T3细胞呈巢蛋白和神经丝轻链阳性.结论 表观修饰后的细胞经诱导后可以呈现nestin和NFL的阳性表达.

关键词：成纤维细胞、重编程、甲基化、表观遗传学、神经细胞

所属期刊栏目：18

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目面上项目11531145

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：30-32,36