siRNA沉默HLA-A2表达的hMSCs对人异体T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2功能的影响

摘要：

目的 探讨应用siRNA技术下调HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem ceIts,hMSCs)对人异体T淋巴细胞分泌功能的调节作用.方法 从成人骨髓中分离和培养hMSCs,并且通过免疫细胞化学检测其表面标志;利用人工合成HLA-A2靶向小分子干扰RNA转染至第3代hMSCs,然后将转染前后的hMSCs,与经植物血凝素(PHA)刺激的人异体T淋巴细胞共同培养.用ELISA分别检测各培养上清液中T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2的水平.结果 原代培养3d后,约70%hMSCs贴壁生长,7d后细胞迅速增殖,进入对数生长期,14d左右进入平台期,第3代细胞多呈梭形生长,形态比较均一,hMSCs表面抗原CD44、CD166阳性.HLA-A2靶向小分子干扰RNA转染3天后,可见少量细胞死亡,免疫荧光染色可见细胞核和部分胞浆呈阳性表达.转染HLA-A2靶向小分子干扰RNA的和未转染的hMSCs均能抑制人T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2,转染后的hMSCs抑制作用强于未转染的hMSCs(P<0.05).结论 体外沉默HLA-A2基因表达可增强hMSCs抑制PHA刺激人T淋巴细胞分泌因子.

关键词：骨髓间充质干细胞、HLA-A2基因、siRNA干扰、人T淋巴细胞

所属期刊栏目：17

分类号：R331.2+2(人体生理学)

资助基金：辽宁省科学技术厅计划课题2006408002-5

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：147-150,153