siRNA沉默HLA-A2基因表达对人脐带间充质干细胞诱导成骨的影响

摘要：

目的 探讨RNAi技术下调人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)HLA-A2基因表达后,对HLA-A2基因诱导成骨的影响.方法 利用HLA-A2靶向小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染hUCMSCs,实验组为转染的细胞,对照组为未转染细胞.免疫细胞化学染色、Western Blot法检测两组细胞HLA-A2的表达;用诱导剂(0.1 μmol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50mg/L维生素C)行成骨诱导分化,茜素红矿化结节染色计数;碱性磷酸酶(ALP)染色以及比色法检测ALP活性.结果 免疫细胞化学染色显示,实验组HLA-A2表达为弱阳性,对照组HLA-A2表达为阳性;Western Blot法检测HLA-A2蛋白的表达量对照组明显高于实验组.茜素红矿化结节染色显示:两组细胞均出现红色结节的阳性染色,但无差异(P＞0.05);两组ALP染色细胞胞浆均呈蓝色阳性反应,ALP话性检测结果显示两组无差异(P＞0.05).结论 应用RNAi技术下调HLA-A2基因表达后,不影响人脐带间充质干细胞的成骨诱导.

关键词：人脐带间充质干细胞、HLA-A2基因、RNA干扰、成骨诱导

所属期刊栏目：16

分类号：R336(人体生理学)

在线出版日期：2010-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：413-417