AIF靶向短发夹RNA干扰重组载体对神经母细胞瘤细胞SHSY5Y的沉默作用
目的 探讨AIF基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒对神经母细胞瘤细胞(SHSY5YAIF)基因的干扰作用.方法 根据siRNA设计原则,构建靶向AIF基因的短发夹RNA干扰质粒(pGPU6/GFP/AIF),使用脂质体法转染人神经母细胞瘤细胞,通过RT-PCR和Wester blot印迹检测神经母细胞瘤细胞AIF基因mRNA和蛋白表达水平.结果 pGPU6/GFP/AIF重组质粒经限制性内切酶酶切及测序证明基因插入正确.质粒成功转染SHSY5Y细胞后,该细胞的AIFmRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05).结论 成功构建靶向AIF基因的shRNA表达载体转染神经母细胞瘤细胞,有效抑制AIFmRNA和蛋白表达,为AIF基因靶向治疗提供前期的实验依据.
神经母细胞瘤、AIF基因、RNA干扰、基因表达
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R730.264(肿瘤学)
辽宁省自然科学基金资助项目2008225010
2010-12-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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