小细胞肺癌细胞诱发人脑微血管内皮细胞紧密连接的开放
目的 小细胞肺癌易发牛脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用.方法 应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌细胞与微血管内皮细胞单层共培养时紧密连接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在内皮细胞紧密连接处的分布情况;应用跨内皮迁移实验及辣根过氧化物酶渗漏实验分析小细胞肺癌细胞与内皮细胞单层共培养后其跨内皮细胞单层的迁移能力和内皮单层渗透性的改变;利用ROCK特异性抑制剂Y27632,分析Rho/ROCK信号通路是否参与小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移.结果 小细胞肺癌细胞能够通过人脑微血管内皮细胞单层迁移,在0 h到12 h之间随培养时间的延长小细胞肺癌细胞的迁移率逐渐增加;共培养8 h时人脑微血管内皮细胞紧密连接处紧密连接结构蛋(ZO-1和occludin)表达减少,通透性明显增加;ROCK特异性抑制剂Y27632能够阻断小细胞肺癌细胞引起的内皮细胞间紧密连接处紧密连接结构蛋白ZO-1和occludin表达减少、内皮单层通透性的增加及小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移.结论 小细胞肺痛细胞与人脑微血管内皮细胞单层共培养诱发人脑微血管内皮细胞间紧密连接的开放,利于小细胞肺癌细胞的跨内皮单层迁移.
小细胞肺癌细胞、人脑微血管内皮细胞、共培养、紧密连接
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R734.2(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30600270
2009-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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